原因

解決辦法

1、篩板阻塞

a、反沖色譜柱  

b、更換進(jìn)口篩板  

c、更換色譜柱

2、色譜柱塌陷

填充色譜柱

3、干擾峰

a、使用更長的色譜柱  

b、改變流動相或更換色譜柱

4、流動相PH選擇錯誤

a、調(diào)整PH值。對于堿性化合物，低PH值b、更有利于得到對稱峰。

5、樣品與填料表面的溶化點(diǎn)發(fā)生反應(yīng)

a、加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑   b、更改色譜柱

原因

解決辦法

1、柱溫低

升高柱溫

2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)

使用流動相作為樣品溶劑

3、樣品過載

降低樣品含量

4、色譜柱損壞

見A1、A2

原因

解決辦法

1、保護(hù)柱或分析柱污染

取下保護(hù)柱再進(jìn)行分析。如果必要更換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染，運(yùn)用適當(dāng)?shù)拇胧?。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。

2、樣品溶劑不溶于流動相

改變樣品溶劑。如果可能采取流動相作為樣品溶劑。

原因

解決辦法

1、樣品過載

減少樣品載量

原因

解決辦法

1、樣品溶劑選擇不恰當(dāng)

a、減少進(jìn)樣體積

b、運(yùn)用低極性樣品溶劑 

原因

解決辦法

1、柱外效應(yīng)

a、調(diào)整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路）

b、使用小體積的流通池

原因

解決辦法

1、二級保留效應(yīng)，反相模式

a、加入三乙胺（或堿性樣品）

b、加入乙酸（或酸性樣品）

c、加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品）

d、更換一支柱子

2、二級保留效應(yīng)，正相模式

a、加入三乙胺（或堿性樣品）

b、加入乙酸（或酸性樣品）

c、加入水（或多官能團(tuán)化合物）

d、試用另一種方法

3、二級保留效應(yīng)，離子對

加入三乙胺（或堿性樣品）

原因

解決辦法

1、緩沖不合適

a、使用濃度50-100mM的緩沖液

b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液

原因

解決辦法

1、樣品中有其他組份

正常

2、前一次進(jìn)樣的洗脫峰

a、增加運(yùn)行時(shí)間或梯度斜率

b、提高流速

3、空位或鬼峰

a、檢查流動相是否純凈

b、使用流動相作為樣品溶劑

c、減少進(jìn)樣體積

原因

解決辦法

1、溫控不當(dāng)

調(diào)好柱溫

2、流動相組分變化

防止變化（蒸發(fā)、反應(yīng)等）

3、色譜柱沒有平衡

在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱

原因

解決辦法

1、流速變化

重新設(shè)定流速

2、泵中有氣泡

從泵中除去氣泡

3、流動相選擇不恰當(dāng)

a、更換合適的流動相

b、選擇合適的混合流動相

原因

解決辦法

1、柱溫波動。（即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導(dǎo)檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。）

控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器

2、流動相不均勻。（流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。）

使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進(jìn)行脫氣，使用中使用氦氣。

3、流通池被污染或有氣體

用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用鹽酸）

4、檢測器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線）

取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。

5、流動相配比不當(dāng)或流速變化

更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。

6、柱平衡慢，特別是流動相發(fā)生變化時(shí)

用中等強(qiáng)度的溶劑進(jìn)行沖洗，更改流動相時(shí)，在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進(jìn)行沖洗。

7、流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成

檢查流動相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑

8、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。

使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間或在分析過程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。

9、使用循環(huán)溶劑，但檢測器未調(diào)整。

重新設(shè)定基線。當(dāng)檢測器動力學(xué)范圍發(fā)生變化時(shí)，使用新的流動相。

10、檢測器沒有設(shè)定在大吸收波長處。

將波長調(diào)整至大吸收波長處

原因

解決辦法

1、在流動相、檢測器或泵中有空氣

流動相脫氣。沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣。

2、漏液

見第三部分。檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。

3、流動相混合不*

用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑

4、溫度影響（柱溫過高，檢測器未加熱）

減少差異或加上熱交換器

5、在同一條線上有其他電子設(shè)備

斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。

6、泵振動

在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器

原因

解決辦法

1、漏液

見第三部分。檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查流通池是否漏液。

2、流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成

檢查流動相的組成。

3、流動相各溶劑不相溶

選擇互溶的流動相

4、檢測器/記錄儀電子元件的問題

斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。

5、系統(tǒng)內(nèi)有氣泡

用強(qiáng)極性溶液清洗系統(tǒng)

6、檢測器內(nèi)有氣泡

清洗檢測器，在檢測器后面安裝背景壓力調(diào)節(jié)器

7、流通池污染（即使是極少的污染物也會產(chǎn)生噪音。）

用1N的硝酸（不能用磷酸）清洗流通池

8、檢測器燈能量不足

更換燈

9、色譜柱填料流失或阻塞

更換色譜柱

10、流動相混合不均勻或混合器工作不正常

維修或更換混合器，在流動相不走梯度時(shí)，建議不使用泵的混合裝置

原因

解決辦法

1、流動相組成變化

重新制備新的流動相

2、流動相流速太低

調(diào)節(jié)流速

3、漏液（特別是在柱子和檢測器之間）

見section 3。檢查接頭是否松動、泵是否漏液、是否有鹽析出以及不正常的噪音。如果必要更換密封。

4、檢測器設(shè)定不正確

調(diào)整設(shè)定

5、柱外效應(yīng)影響

a、柱子過載

b、檢測器對反應(yīng)時(shí)間或池體積響應(yīng)過大

c、柱子與檢測器之間的管路太長或管路內(nèi)徑太大

d、記錄儀響應(yīng)時(shí)間太長

a、小體積進(jìn)樣（例如：10ul而不是100ul）以1：10或1：100的比例稀釋樣品

b、減少響應(yīng)時(shí)間或使用更小的流通池

c、使用內(nèi)徑為0.007-0.01的短管路

d、減少響應(yīng)時(shí)間

6、緩沖液濃度太低

增加濃度

7、保護(hù)柱污染或失效

更換保護(hù)柱

8、色譜柱污染或失效，塔板數(shù)較低

更換同樣類型的色譜柱。如果新柱子可以提供對稱的色譜峰，則用強(qiáng)溶劑沖洗舊柱子。

9、柱入口塌陷

打開柱入口，填補(bǔ)塌陷或更換柱子

10、呈現(xiàn)兩個或多個未被*分離的物質(zhì)的峰

選擇其它類型的色譜柱以改善分離效果

11、柱溫過低

提高柱溫。除非特殊情況，溫度不宜超過75℃

12、檢測器時(shí)間常數(shù)太大

使用較小的時(shí)間常數(shù)

原因

解決辦法

1、流動相污染或變質(zhì)（引起保留時(shí)間變化）

重新配置流動相

2、保護(hù)柱或分析柱阻塞

去掉保護(hù)柱進(jìn)行分析。如果必要則更換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞，可進(jìn)行反沖。如果問題仍然存在色譜柱可能被強(qiáng)保留的污染物損壞，建議使用恰當(dāng)?shù)某绦颉Ｈ绻麊栴}仍然存在，進(jìn)口可能阻塞了，更換入口處的篩板或更換色譜柱。

原因

解決辦法

1、檢測器衰減設(shè)定過高

減少衰減的設(shè)定

2、檢測器時(shí)間常數(shù)設(shè)定太大

設(shè)定較小的時(shí)間常數(shù)

3、進(jìn)樣量太少

增大進(jìn)樣量

4、記錄儀連接不當(dāng)

使用正確的連接

原因

解決辦法

1、檢測器衰減設(shè)定過低

采取較大的衰減

2、進(jìn)樣過多

減少進(jìn)樣量

3、記錄儀連接不正確

正確連接記錄儀